MM1029-30ML-花粉活力检测试剂盒

Pollen Viability Test Kit (Peroxidase Assay)

花粉活力检测试剂盒（过氧化物酶法）

产品信息

应用背景

花粉活力的大小直接影响授粉、受精过程，与植物的产量密切相关，通过花粉活力的测定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形态、生理特征，花粉活力的检测方法常用的有：花粉萌发测定法、碘-碘化jia（I2-KI）染色法、TTC染色法、过氧化物酶检测，MTT、FDA等方法。

产品描述

过氧化物酶（Peroxidase）是常用的花粉活力染色法之一，工作原理在于：花粉中含过氧化物酶。活力高的花粉过氧化物酶活性也高，过氧化物酶与氧化剂（比如：过氧化氢）形成一种复合物 ，复合物中的过氧化氢被活化，从而能氧化酚类化合物。根据颜色变化可判断花粉的活力。

试剂盒组成

注意事项

1） 本品开盖后请尽快使用，否则效率会下降。如果溶液变成红色，需弃用。

2） TTC染色液对人体有轻微刺激性，请注意小心防护；

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存与运输方法

保存：-20℃~+4℃保存，具体组分按照标签要求来保存。12个月有效。

运输：冰袋运输。

操作方法【详见懋康网站整理】

2.1配制氧化剂工作液：取适量的氧化剂，按氧化剂：蒸馏水=1：99的比例混合，即得到氧化剂工作液。

本氧化剂工作液+4℃保存，3个月有效。需注意，氧化剂有腐蚀性，小心操作，做好防护工作。

2.2取成熟将要开放的新鲜花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.3将花粉物质置于洁净载玻片上，分别滴加配制好的芳香胺显色液、氧化剂工作液各1滴，混匀，盖上盖玻片。

【注】：染色时需将花粉完quan浸没于染色液中；

2.4 30℃恒温箱孵育10~15min，低倍显微镜观察着色情况，每片取5个视野。

2.5统计100粒花粉的颜色。

三、染色结果观察：

活力强——紫红色；

活力弱——淡红色；

无活力或不育——无色。

计算：观察并统计100粒花粉，计算有活力花粉的百分数，其公式为：

花粉活力百分数（%）=有活力花粉数/100 ×100%

染色示例（来自文献，仅做参考）

文献来源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

试验对象：凤丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

试验目的：比较九种不同的花粉活力检测方法，包括：MTT、醋酸洋红、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 过氧化物酶、亚甲基蓝、FDA等，来鉴别有活力和无活力花粉。

试验结果：

FigComparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

试验结论：本课题中发现MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效区分有活力和无活力花粉，其中，FDA染色结果与花粉萌发结果类似。

文献来源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

试验对象：红薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

试验目的：花粉活力测定

试验图片：

FigComparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar = 200 μm. (b) TTC, bar = 200 μm. (c) Magenta acetate, bar = 200 μm. (d) FDA, bar = 200 μm. (e, f) In situ germination, bar = 500 μm. (g) In vitro germination, bar = 100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P < 0.001), and error bars represent standard deviations

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