EZI982K-EZ-Tn5™ <KAN-2> Insertion Kit

名称： EZ-Tn5™ <KAN-2> Insertion Kit
货号： EZI982K
单位： 10 Rxns
储藏温度：-20℃
供应商：上海古朵生物

EZ-Tn5™ <KAN-2>, EZ-Tn5™ <TET-1>, and EZ-Tn5™ <DHFR-1> Insertion Kits
应用：
可完整测序质粒，cosmid, fosmid或BAC载体上的基因组克隆序列或cDNA序列，不需要亚克隆或步移测序。
EZ-Tn5™ Insertion Kits* 可便捷快速的进行>2 kb的DNA克隆测序，不需要亚克隆或步移测序。一步简单体外反应使含有筛选标记（筛选标记可以是卡那霉素，四环素，甲氧氨苄嘧啶）的EZ-Tn5转座子随机插入克隆。然后转化大肠杆菌，筛选标记筛选转座子。使用盒子提供的引物结合在转座子插入位置两侧的引物结合位点，进行双向测序（图1）。
好处

• 高度的随机性确保了引物结合位点分布于整个克隆，确保比引物步移或亚克隆更好的序列覆盖率
• 单一反应产生高达10 6个克隆的插入，即使是大的克隆，也足够测序使用。而且通常比亚克隆，设计和成测序引物节省时间。
• 使用一组的测序引物（盒子提供）可测序任何克隆。
• 该EZ-Tn5的系统可以用于处理多个DNA样品，使其成为高通量测序的有效成分。4

图1 使用EZ-Tn5™ Insertion Kit产生DNA测序模板的过程。通过卡那霉素，四环素，甲氧氨苄嘧啶平板选择

图2.55个随机挑选的EZ-Tn5™ <TET-1>转座插入一个7.8kbDNA的位置图谱，证明了其高度随机性。以50bp长度序列分析GC含量表明转座插入没有GC或AT的偏好性。