产品详情
名称: EZ-Tn5™ In-Frame Linker Insertion Kit
货号: EZI04KN
单位: 10 Rxns
储藏温度:-20℃
供应商:上海古朵生物
应用
The EZ-Tn5™ In-Frame Linker Insertion Kit
是一个基于转座子的蛋白修饰系统 ,它可快速容易的产生随机57bp编码表达蛋白的DNA片段。由于插入的是19个密码子的可读框架,盒子可用来鉴定关键调节因子,结合区域,催化区和任何蛋白位点。
该盒子包括一个卡那霉素筛选标记,两端是NotI位点。程序包括引入19个密码子的克隆DNA插入片段,如图1.一个简单的体外酶反应,随机插入一个EZ-Tn5 <Not I/KAN-3>转座子到每个克隆中,产生>106卡那抗性插入克隆。插入的克隆可通过基因功能分析鉴定或通过转座子插入位点的测序图谱鉴定。所选择的克隆,通过notI酶切,转座子中存在卡那抗性(图2)。
每个notI消化的克隆可再连接后转化高效大肠杆菌(e.g., TransforMax™ EC100™ )感受态细胞,
得到的克隆每个含有一个随机的19密码子的插入可读框。因此在插入位点两端蛋白保留了原有的氨基酸序列。盒子提供两个未标记的引物,方便EZ-Tn5转座子插入位点的测序和绘制图谱。
好处: