产品详情
名称: CopyControl™ HTP Fosmid Library Production Kit
货号: CCFOS059
单位: 1 Kit
储藏温度:-20℃
供应商:上海古朵生物
应用:
•可完成各种生物样本编制完整和无偏向的Fosmid文库,利用自动诱导液保证单拷贝和诱导高拷贝数量的需要。
•可以用水和土壤等含有微生物的环境样品构建宏基因组文库。
CopyControl™Fosmid文库构建试剂盒提供了高效改良的建库方法,可以构建约40 kb克隆的文库。
CopyControl pCC1FOS™载体包含大肠杆菌F因子单拷贝复制起点以及可诱导高拷贝oriV。
CopyControl Fosmid克隆通常培养于单拷贝中,以确保毒蛋白和不稳定DNA测序的插入的定性和成功克隆。
在DNA纯化前Fosmid克隆可以快速诱导达到每个细胞50拷贝。这一步,大大增加了DNA产量,同时保持质粒的稳定。
CopyControl HTP Fosmid文库包含pCC2FOS载体,它是针对末端测序优化设计的,尤其在高通量测序方面。
与Agencourt生物科技公司联合设计的引物,消除了昂贵的不必要的引物测序……
此外,在每个引物3'末端的七个碱基序列是专门设计,以尽量减少对模板纯化后大肠杆菌DNA的任何误引导。
试剂盒通过随机剪切DNA,采用克隆平端DNA【pian】段的策略,以产生更加完整和公正的,可以通过部分限制性内切酶消化获得的基因库。
首先将基因组DNA剪切成约40 kb的片段。剪切的DNA pian段经过末端修复变成钝末端,然后经过5'-磷酸化、大小筛选,然后从低融点琼脂糖凝胶回收。后,将大小选定的DNA接到cloning-ready CopyControl pCC1FOS 载体或者 pCC2FOS载体上。用试剂盒附带的高效MaxPlax™拉姆达包装蛋白(包装效率>109 pfu/µg)进行包装,后接种到附带的EPI300细胞中。
有点:
•CopyControl pCC1FOS和pCC2FOS载体:线性化,去磷酸化,纯化,已经为连接做好准备。
•不需要限制性内切酶消化或脉冲凝胶电泳来准备用于克隆的基因组DNA。
•使用pCC2FOS载体可以大化高通量末端测序结果。
•可以诱导单拷贝到每个细胞50拷贝。安全地获得较高的DNA产量,同时保持了稳定克隆单拷贝数。
•高效率的lambda包装蛋白消除了背景值假阳性。
•比BAC克隆更快更容易。