P1469/HB2151大肠克隆菌

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产品名称:P1469/HB2151大肠克隆菌
菌株名称：E. coli HB2151 Cells
规格：100μL/管
状态：20%甘油保存
性质参数：K12 (lac-pro), ara, nalr, thi/F'[proAB, lacIq, lacZ M15].
特点：是染色质外的双链共价闭合环形DNA（covalently closed circular DNA,cccDNA），可自然形成超螺旋结构，不同质粒大小在2-300kb之间，<15kb的小质粒比较容易分离纯化，>15kb的大质粒则不易提取。

建议：
1. 菌株保存在20%甘油的培养基中，接到菌株后，请挑取菌液在2x YT-N平板（2xYT medium containing 100 μg/ml nalidixic acid）上划线，37℃过夜培养后，再次挑取单个菌落在Minimal Medium 平板上划线，37℃过夜培养后即可使用，以便使纤毛充分表达，利于噬菌体感染；
2. 在Minimal Medium 平板上生长的细菌，不宜在冰箱中放置过久再使用；
3. Minimal Medium plate 配制方法：
Prepare stocks of the following:
       1 M MgCl2•6H2O: Dissolve 20.33 g in distilled water to a final volume of 100 ml and autoclave.
       1 M CaCl2•2H2O: Dissolve 14.7 g in distilled water to a final volume of 100 ml and autoclave.
       1 M thiamine hydrochloride: Dissolve 33.73 g in distilled water to a final volume of 100 ml and sterilize using a 0.22 μm filter.
       20% glucose: Dissolve 20 g of D-(+)-glucose (anhydrous) in distilled water to a final volume of 100 ml and sterilize by filtration through a 0.2 μm filter. Do not autoclave.
       In a 500 ml bottle, dissolve 6 g of Na2HPO4 (dibasic), 3 g of KH2PO4(monobasic) and 1 g of NH4Cl in distilled water to a final volume of 500 ml. adjust the pH to 7.4 with NaOH.
       In a separate 1 liter bottle, add distilled water to 15 g of Bacto-agar to a final Volume of 500 ml. Autoclave both bottles simultaneously to sterilize. Cool both bottles to 50-60°C and combine.  Add1 ml of 1 M MgCl2•6H2O, 1 ml of 1 M CaCl2•2H2O, 1 ml of 1 M thiamine hydrochloride and 5 ml of 20% glucose. Pour plates immediately.

注意事项:
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用本产品的甘油菌时可以不用*融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可以*融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。

P1469/HB2151大肠克隆菌 质粒分类:
1.根据质粒能否通过细菌的接合作用，可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。

2.根据质粒的不相容性，可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象，反之为相容性。常用于流行病学的调查。

3.根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类：严紧控制型和松弛控制型。严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用，只能在细胞周期的一定阶段进行复制，当细胞染色体停止复制时，质粒也就不再复制。松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响，在整个细胞生长周期中随时都可以复制，在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。

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