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产品名称:P1307/pCDH-ECMV-MCS-3×Flag-EF1α-ZsGreen1-T2A-Puro慢病毒表达质粒
启动子: ECMV promoter
复制子: pUC ori,SV40 ori
终止子: WPRE
质粒分类: 病毒系列质粒;慢病毒类质粒;病毒表达质粒
质粒大小: 8538bp
原核抗性: Amp(100μg/ml)
筛选标记: ZsGreen1,Puro
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37℃,LB,有氧
表达宿主: 293T等哺乳细胞
培养条件: 37℃,5%CO2
诱导方式: 无需诱导
5'测序引物: CMV-F(CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG)
3'测序引物: EF1-R(CTAGGCACCCGTTCAATTGC)
特点:是染色质外的双链共价闭合环形DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,<15kb的小质粒比较容易分离纯化,>15kb的大质粒则不易提取。
简介: pCDH-ECMV-MCS-3×FLAG-EF1α-ZsGreen1-T2A-Puro质粒是在pCDH载体的基础上改造而成,CMV启动目的基因表达,C端的3×FLAG融合标签能很好的被FLAG抗体识别。该质粒可作为过表达质粒直接转染哺乳细胞,也可包装成慢病毒侵染细胞。质粒本身带有ZsGreen1荧光蛋白和Puro筛选标记,可利用荧光显微镜观察转染效率,也可用嘌呤霉素筛选转染后的细胞得到阳性克隆。
P1307/pCDH-ECMV-MCS-3×Flag-EF1α-ZsGreen1-T2A-Puro慢病毒表达质粒 质粒分类:
1.根据质粒能否通过细菌的接合作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。
2.根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象,反之为相容性。常用于流行病学的调查。
3.根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类:严紧控制型和松弛控制型。严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用,只能在细胞周期的一定阶段进行复制,当细胞染色体停止复制时,质粒也就不再复制。松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响,在整个细胞生长周期中随时都可以复制,在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
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