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产品名称:P0674/p3×Flag-CMV-13哺乳表达质粒
启动子: CMV,SV40,T7
复制子: F1 ori , pUC ori
终止子: SV40 poly(A) signal,hGH poly(A) signal
质粒分类: 哺乳细胞,蛋白过表达载体
质粒大小: 6362bp
原核抗性: Amp
筛选标记: Neo
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
5'测序引物: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'测序引物: hGH-PA-R:CCAGCTTGGTTCCCAATAGA
特点:是染色质外的双链共价闭合环形DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,<15kb的小质粒比较容易分离纯化,>15kb的大质粒则不易提取。
简介: The p3XFLAG-CMV-13 Expression Vector is a 6.3kb derivative of pCMV5 used to establish expression of transient or unstable C-terminal 3XFLAG fusion proteins in mammalian cells. The vector encodes three adjacent FLAG epitopes (Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp) downstream of the multiple cloning region. This results in increased detection sensitivity using ANTI-FLAG M2 antibody. The promoter-regulatory region of the human cytomegalovirus drives transcription of FLAG-fusion constructs. The preprotrypsin leader sequence precedes the FLAG sequence. The aminoglycoside phosphotransferase II gene (Neo) confers resistance to aminoglycosides such as G 418, allowing for selection of stable transfectants. p3XFLAG-CMV-13 Expression Vector is a shuttle vector for E. coli and mammalian cells. Efficiency of replication and genomic integration is optimal when using an SV40 T antigen-expressing host, such as COS cells.
P0674/p3×Flag-CMV-13哺乳表达质粒 质粒分类:
1.根据质粒能否通过细菌的接合作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。
2.根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象,反之为相容性。常用于流行病学的调查。
3.根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类:严紧控制型和松弛控制型。严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用,只能在细胞周期的一定阶段进行复制,当细胞染色体停止复制时,质粒也就不再复制。松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响,在整个细胞生长周期中随时都可以复制,在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
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