NovaBios-黄热病酶免试剂

美国NovaBios 黄热病酶免试剂 黄热病酶联免疫检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

黄热病毒IgM、IgG、ELISA检测试剂、黄热病快速检测试剂盒、

黄热病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黄热病检测试剂盒

美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

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【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

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流行病学
黄热病发生在撒哈拉以南非洲和热带南美洲，在那里它是流行性和间歇性流行的（见表3-22和3-23列出了有YFV传播风险的国家）。大多数黄热病是由于sylvatic或中间传播周期。然而，城市黄热病定期在非洲发生，而在美洲也是零星地发生的。在非洲地区，随着YFV的持续流通，自然免疫随着年龄的增长而积累，因此，婴儿和儿童患疾病的风险zui高。在南美洲，在未经免疫的年轻男性中，通过在森林地区工作接触蚊子载体的黄热病zui常发生。
旅行者风险
旅行者获得黄热病的风险由各种因素决定，包括免疫状况，旅行地点，季节，接触时间，旅行时的职业和娱乐活动以及旅行时的当地病毒传播率。尽管报告的人类疾病病例是疾病风险的主要指标，但病例报告可能不存在，因为传播水平低，人群免疫力高（例如因为接种疫苗）或地方监视系统黄热病败检测病例。这种“流行病学沉默”不等于没有风险，不应该在不采取保护措施的情况下导致旅行。
西非农村的YFV传播是季节性的，雨季结束和旱季开始（通常是7月至10月）的风险较高。然而，YFV可能由Ae偶然发送。即使在农村和密集的城市地区的干旱季节，埃及也是如此。
南美洲的感染风险在雨季（1月至5月，2月和3月发病高峰）zui高。鉴于感染人类可能发生的病毒血症水平高，而且Ae广泛分布。埃及在许多城市和城市，南美洲有大规模城市流行的风险。
从1970年到2015年，共有10例黄热病患者来自美国和欧洲的未接种的旅行者，他们前往西非（5例）或南美洲（5例）。这10名旅客中有8人（80％）死亡。在接种疫苗的旅客中只有1例记录了黄热病。这种非致命的病例发生在西班牙，1988年访问了几个西非国家的旅行者。在2016年初，来自非洲和亚洲的15名长期旅行者在访问了安哥拉之后，发生了黄热病，这是zui大的城市暴发之一。据说，没有一个生病的旅行者接种疫苗。
由于病毒传播的生态决定因素的变化，难以预测获得黄热病的风险。在为期两周的住宿期间，预计访问流行地区的未接种疫苗的黄热病可能导致疾病和死亡风险：
西非分别为每100,000人50人，10万人10人
南美洲分别为每100,000人中5人，每10万人1人

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我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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Epidemiology
Yellow fever occurs in sub-Saharan Africa and tropical South America, where it is epidemic and intermittent epidemic (see Table 3-22 and 3-23 lists countries with YFV risk). Most yellow fever is due to sylvatic or intermediate propagation cycles. However, urban yellow fever occurs regularly in Africa and occurs sporadically in the Americas. In the African region, with the continued flow of YFV, natural immunization accumulates with age, so infants and children have the highest risk of developing disease. In South America, yellow fever, which is exposed to mosquito vectors in the forest area, is the most common among young men without immunization.
Traveler risk
Travelers' risk of getting yellow fever is determined by a variety of factors including immune status, travel location, season, contact time, career and recreational activities during travel, and local viral transmission rates during travel. Although the reported case of human disease is a major indicator of disease risk, the case report may not exist because of low levels of transmission, high levels of human immunization (eg, vaccination) or local surveillance system. This "epidemiological silence" does not mean that there is no risk and should not lead to travel without resorting to protective measures.
YFV transmission in West African rural areas is seasonal, with a higher risk of the end of the rainy season and the beginning of the dry season (usually from July to October). However, YFV may be sent by Ae by chance. Even in rural and dense urban areas during the dry season, Egypt is also true.
Infection risk in South America was highest in the rainy season (peak months from January to May, February and March). In view of the high level of viremia that may occur in humans, Ae is widely distributed. Egypt in many cities and cities, South America has the risk of large-scale urban pop.
From 1970 to 2015, a total of 10 cases of yellow fever patients from the United States and Europe, unspecified travelers, they went to West Africa (5 cases) or South America (5 cases). Eight of the 10 passengers (80%) died. Only one case of vaccinated travelers recorded yellow fever. This non-fatal case occurred in Spain and in 1988 visited several travelers from West African countries. At the beginning of 2016, 15 long-term travelers from Africa and Asia, after visiting Angola, had a yellow fever, which was one of the largest urban outbreaks. It is said that no sick travelers were vaccinated.
Because of the ecological determinants of virus transmission, it is difficult to predict the risk of getting yellow fever. During the two-week stay, it is expected that access to epidemic areas of non-vaccinated yellow fever may lead to disease and death risk:
West Africa, respectively, for every 100,000 people 50 people, 10 million people 10 people
South America is 5 per 100,000 people, 1 per 100,000 people