NovaBios-黄热病酶联试剂

美国NovaBios 黄热病酶联试剂 黄热病毒酶联免疫ELISA试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

黄热病毒IgM、IgG、ELISA检测试剂、黄热病快速检测试剂盒、

黄热病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黄热病检测试剂盒

美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

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【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

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由于病毒传播的生态决定因素的变化，难以预测获得黄热病的风险。在为期两周的住宿期间，预计访问流行地区的未接种疫苗的黄热病可能导致疾病和死亡风险：
西非分别为每100,000人50人，10万人10人
南美洲分别为每100,000人中5人，每10万人1人
疾病爆发期间发生疾病的风险可能更高。这些估计是基于对土着居民的风险的粗略指导，通常在传播旺季期间。因此，这些风险估计可能无法准确反映旅行者的风险，旅行者可能有不同的免疫状况，采取预防措施，防止被蚊子咬伤，户外暴露较少。
在南美洲发现黄热病的风险低于非洲，因为在南美洲森林冠层黄热病之间传播病毒的蚊子并不常与人接触。此外，由于疫苗使用，当地居民的免疫力相对较高，这可能降低传播风险。
临床表现
认为无症状或临床不明显的感染发生在大多数感染YFV的人群中。对于发生症状性疾病的人，潜伏期通常为3-6天。初始疾病表现为非特异性流感综合征，突发性发烧，发冷，头痛，背痛，肌痛，呕吐，黄热病和呕吐。大多数患者在初次给药后有所改善。经过几小时到一天的短暂缓解，大约15％的患者进展到更严重或有毒的疾病形式，其特征在于黄疸，出血性症状，以及zui终的休克和多系统器官衰竭。严重肝肾功能不全者死亡率为20％?50％。
诊断
初步诊断依据患者的临床特征，旅游地点和日期以及活动情况。实验室诊断由：
在YFV或黄热病病毒RNA的疾病早期进行病毒分离或核酸扩增测试。然而，在更明显的症状得到承认之后，病毒或病毒RNA可能无法检测到。因此，病毒分离和核酸扩增不应用于排除黄热病的诊断。
用于检测病毒特异性IgM和IgG抗体的血清学检测。由于针对其他黄病毒提出的抗体之间的交叉反应性，应进行更具体的抗体测试，如斑块减少中和试验，以确认感染。
临床医生应他们的州或地方卫生部门，或致电CDC诺博病毒科，以协助黄热病感染的诊断测试，以及关于接种疫苗抗体的问题。黄热病是国家通报的疾病。
治疗
没有具体的药物治疗YFV感染;治疗是针对症状缓解或挽救生命的干预措施。休息，流体和使用镇痛药和解热药可缓解发烧和疼痛的症状。应注意避免药物，如阿司匹林或非甾体抗炎药物，这可能会增加出血的风险。感染者应在发病的头几天内免受进一步的蚊子接触（住在室内或蚊帐下），因此不会对传播周期作出贡献。

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我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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Because of the ecological determinants of virus transmission, it is difficult to predict the risk of getting yellow fever. During the two-week stay, it is expected that access to epidemic areas of non-vaccinated yellow fever may lead to disease and death risk:
West Africa, respectively, for every 100,000 people 50 people, 10 million people 10 people
South America is 5 per 100,000 people, 1 per 100,000 people
The risk of developing a disease during a disease outbreak may be higher. These estimates are based on rough guidance on the risks of indigenous populations, usually during the peak season. Therefore, these risk estimates may not accuray reflect the risk of travelers, travelers may have different immune conditions, take precautions to prevent mosquito bites, outdoor exposure less.
The risk of yellow fever is found in South America is lower than in Africa, because mosquitoes that travel between the canopy yellow fever in South America are not in contact with people. In addition, due to the use of the vaccine, the local residents of the relatively high immunity, which may reduce the risk of transmission.
Clinical manifestations
It is thought that asymptomatic or clinically unknown infections occur in most people infected with YFV. For people with symptomatic disease, the incubation period is usually 3-6 days. The initial disease manifests itself as nonspecific influenza syndrome, sudden fever, chills, headaches, back pain, myalgia, vomiting, yellow fever and vomiting. Most patients improved after initial administration. After a few hours to one day of short remission, about 15% of patients progress to more severe or toxic forms of disease, characterized by jaundice, hemorrhagic symptoms, and final shock and multiple system organ failure. Severe liver and kidney dysfunction were 20% to 50%.
diagnosis
The initial diagnosis is based on the patient's clinical characteristics, travel location and date, and activity. Laboratory diagnosis is best made by:
Virus isolation or nucleic acid amplification assays were performed early in the disease of YFV or yellow fever virus RNA. However, after more obvious symptoms are recognized, viral or viral RNA may not be detected. Therefore, virus isolation and nucleic acid amplification should not be used to rule out the diagnosis of yellow fever.
For the detection of virus-specific IgM and IgG antibody serological tests. Due to cross-reactivity between antibodies against other flaviviruses, more specific antibody tests should be performed, such as plaque reduction neutralization tests to confirm infection.
Clinicians should contact their state or local health department, or call the CDC Norobutoviridae to assist in the diagnosis of yellow fever infection, as well as questions about vaccination of antibodies. Yellow fever is a nationally reported disease.
treatment
There is no specific drug for the treatment of YFV infection; treatment is an intervention for symptom relief or life saving. Rest, fluid and the use of analgesics and antipyretic drugs can relieve fever and pain symptoms. Care should be taken to avoid drugs such as aspirin or nonsteroidal antiinflammatory drugs, which may increase the risk of bleeding. Infected persons should be protected from further mosquitoes (living in indoors or mosquito nets) for the first few days of the disease and will not contribute to the transmission cycle.