NovaBios-黄热病毒IGG/IGM快速检测卡

美国NovaBios 黄热病毒IGG/IGM快速检测卡

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

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黄热病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

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美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

美国NovaBios 黄热病毒IGG/IGM快速检测卡

【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

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据报道，YEL-AVD仅在*剂黄热疫苗后才发生;在世界范围内，加强剂量后，没有实验室确认的YEL-AVD报告。对于在美国报道的YEL-AVD病例，从黄热病接种至症状发作的中位数为4天（范围为1-18天）。美国所有报告的YEL-AVD病例的死亡率约为46％。美国YEL-AVD的发病率为每10万剂疫苗施用0.3例。年龄≥60岁的人群的比例更高，每100,000次剂量为1.2次。 70岁以上人群的比例更高。
禁忌症
超过6个月的婴儿
黄热病疫苗对于<6个月的婴儿是禁忌的。这种禁忌症是在20世纪60年代后期针对接种疫苗的幼儿（50-400 / 100,000）记录的YEL-高比例进行的。婴幼儿增加神经毒力的机制是未知的，但可能是由于血脑屏障不成熟，病毒血症越来越长或免疫系统不成熟。
过敏症
黄热病疫苗对于先前剂量的疫苗具有急性超敏反应史的人以及具有对任何疫苗组分（包括鸡蛋，蛋制品，鸡蛋白）的过敏反应史的人是禁忌的，或明胶。疫苗小瓶中使用的塞子还含有干燥的天然乳胶橡胶，可能引起过敏反应。
如果对具有任何疫苗组分过敏反应的人的疫苗接种被认为是*的，因为获得黄热病的风险很高，如疫苗包装插入物中所述，皮肤测试应在密切的医疗监督下进行。如果一个人对疫苗进行了阳性皮肤试验或具有严重的蛋敏感性并且建议接种疫苗，如包装插页中所述的脱敏可以在经历过过敏反应的医生的直接监督下进行。
改为免疫状态
胸腺疾病 - 黄热病疫苗禁用于与免疫细胞功能异常相关的胸腺疾病患者，如胸腺瘤或重症肌无力。如果患有这种胸腺疾病的人不能避免前往黄热病流行地区，那么应该提供医疗豁免，并强调有关蚊子叮咬的保护措施的咨询。由于没有证据表明，在经历了偶然手术切除胸腺或间接放射治疗的人中，发生黄热病疫苗相关严重不良事件的风险增加，这些人可能会被给予黄热病疫苗如果推荐或需要。

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我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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It was reported that YEL-AVD only occurred after the first dose of yellow fever vaccine; worldwide, after strengthening the dose, there was no laboratory confirmation of YEL-AVD reported. For the YEL-AVD cases reported in the United States, the median number of episodes from yellow fever to symptom onset was 4 days (range, 1-18 days). All reported YEL-AVD cases have a mortality rate of approximay 46%. The incidence of YEL-AVD in the United States was 0.3 per 100,000 doses of vaccine. The proportion of people aged ≥60 years is higher, 1.2 times per 100,000 doses. The proportion of people over 70 years of age is higher.
Contraindications
More than 6 months baby
Yellow fever vaccine is contraindicated for infants <6 months. This contraindication was carried out at a high proportion of YEL-recorded for vaccinated young children (50-400 / 100,000) in the late 1960s. Infants and young children to increase the mechanism of neural toxicity is unknown, but may be due to immature blood-brain barrier, viremia is getting longer or immune system immature.
Allergy
Yellow fever vaccine is contraindicated for people who have a history of acute hypersensitivity to previous doses of the vaccine and who have an allergic reaction to any vaccine component (including eggs, egg products, egg white), or gelatin. Vaccine vials used in the plug also contains dry natural latex rubber, may cause allergic reactions.
Vaccination of people with allergic reactions to any vaccine component is considered essential because the risk of obtaining yellow fever is high, as described in the vaccine packaging insert, the skin test should be under close medical supervision get on. If a person has a positive skin test on the vaccine or has severe egg sensitivity and recommends vaccination, desensitization as described in the packaging insert can be carried out under the direct supervision of an experienced patient.
To an immune state
Thymic disease - yellow fever vaccine is contraindicated in patients with thymic disease associated with immune cell dysfunction, such as thymoma or myasthenia gravis. If people suffering from this thymus disease can not avoid going to yellow fever epidemic areas, then should provide medical exemption, and stressed the mosquito bite protection measures advice. There is no evidence that there is an increased risk of serious adverse events associated with yellow fever vaccines in those who undergo an accidental surgical resection of thymus or indirect radiotherapy, and these people may be given a yellow fever vaccine if recommended or needed.