NovaBios-黄热病毒抗体ELISA检测试剂盒

美国NovaBios 黄热病毒抗体ELISA检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌黄热病检测试剂盒，包括美国的NovaBios、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

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黄热病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

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美国CDC的黄热病毒诊断试剂——美国的NovaBios

美国NovaBios 黄热病毒抗体ELISA检测试剂盒

【黄热病简介】
黄热病，历*称为黄色杰克，黄色瘟疫或青铜约翰，是一种急性病毒性疾病。在大多数情况下，症状包括发热，寒战，食欲不振，特别是在背部的肌肉痛，和头痛。症状通常在五天内改善。在一些人在一天内改善，发烧回来，腹痛发生，肝损伤开始导致黄色皮肤。如果发生这种情况，出血和肾脏问题的风险也增加。

【检测原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特异性抗原。将对照或测试样品加入到合适的孔中并孵育。用洗涤缓冲液洗去游离组分。将HRP缀合的检测试剂加入到孔中。TMB底物用于显现HRP酶反应。TMB由HRP催化以产生在加入酸性停止溶液后变为黄色的蓝色产物。黄色的密度与板中捕获的样品的YFV-IgM/IgG量成比例。外径在微板读数器中在450nm下通过分光亮度计测量吸亮度，然后可以计算YFV-IgM/IgG的浓度。

产品规格：96T/盒
检测范围：定性
灵敏度：定性
储存和使用期：2-8℃ 储存12个月
产品应用：用于定性检测人血清，血浆，细胞培养上清液或任何生物液体中的YFV-IgM。

【套件组件】
1.一个96孔板预涂
2.阳性对照：0.5ml
3.阴性对照：0.5ml
4.洗涤缓冲液（30×）：20 ml。稀释：1:30
5.样品稀释缓冲液：6ml
6.6HRP酶联试剂（RTU）：6ml
7.终止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培养箱
2.酶标仪（波长：450nm）
3.精确的移液器和一次性移液器吸头
4.自动洗板机
5.ELISA振荡器
1.5ml管
7.板盖
8.吸收滤纸
9.100ml和1L体积量筒。

【操作程序】
A.制备样品和试剂
1. 样品
收集并立即分析测试样品（2小时内）后立即分离。或等分并长期储存在-20°C。避免多个冻融循环。
细胞培养上清：以约2000-3000×rpm离心20分钟，以去除沉淀，立即分析或分装，并储存于-20℃。
血清：在室温下凝结血清（约4小时）。以约2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析血清或等分，并储存在-20°C。
血浆：用柠檬酸盐或EDTA作为抗凝剂收集血浆。在收集30分钟内以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
尿：在无菌容器中收集，以2000-3000×rpm离心20分钟。立即分析或等分，并存储在-20°C冷冻。
组织：组织匀浆的制备将根据组织类型而变化。收集和冲洗样品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。称重样品并用PBS（Ph 7.4）匀化，并对细胞悬浮液进行超声处理。以2000-3000×rpm离心20分钟。立即测定或等分并储存在-80℃。
（注意：1.*凝结血液样品，离心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作试验样品防腐剂，因为它抑制HRP。）

2.洗涤缓冲液
用蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液30倍（1/30）（即将20ml浓缩洗涤缓冲液加入580ml蒸馏水中）。

B.测定程序
在使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温。建议绘制每个测试的标准曲线。
1.在预涂板上分别设置阳性/阴性，测试样品和对照（零）孔，并记录它们的位置。
2.将50μl的阴性和阳性对照等分到设定的孔中。
3.向对照（零）孔中加入50μl样品稀释缓冲液。
4.向测试样品孔中加入50μl适当稀释的样品（样品稀释比例：1：5）。在底部加入溶液而不接触侧壁。摇动平板以混合内容物。
5.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
6.取下盖子并通过在吸收性滤纸或其他吸收材料上敲击板来丢弃板内容物。
7.弃去溶液，用洗涤缓冲液洗涤板5次。不要让孔在任何时候*干燥。
手动清洗：丢弃溶液，不要接触侧壁。将吸水滤纸或其他吸收材料上拍出液体。将洗涤缓冲液填满每个孔，并在ELISA振荡器上轻轻涡流2 分钟。丢弃内容物，并将吸收性滤纸或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自动洗涤：弃去所有孔中的溶液，并用洗涤缓冲液洗涤板5次（用缓冲液过量填满孔）。在zui后的洗涤之后，翻转该板并敲击吸收性滤纸或其它吸收材料。建议将清洗器设置为1分钟的浸泡时间。
8.向每个孔中加入50μlHRP结合物的试剂（对照孔除外）。在每个孔底部加入溶液，不要接触侧壁。
9.用盖子密封板，并在37℃孵育30分钟。
10.取下盖子，用洗涤缓冲液洗板5次。
11.向每个孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，盖上平板并在37℃下孵育15分钟。避免暴露于光。
12.向每个孔中加入50μl终止液，充分混匀。颜色应立即变为黄色。
13.阅读O.D.在微板读数器中在450nm的吸亮度在加入终止溶液的15分钟内。对于计算，（相对O.D.450）=（每个孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。标准曲线可以作为每种标准溶液（Y）的相对O.D.450与标准溶液（X）的相应浓度作图。可以从标准曲线插入样品的人类YFV-IgM浓度。
14.注意：如果稀释样品，稀释倍数乘以内插法得到稀释前的浓度。

C.结果确定
1.试验有效性：阳性对照的平均值≥1.00; 阴性对照的平均值≤0.10。
2.临界值（CUT OFF）计算：临界值=负控制的平均值+0.15
3.阴性结果：如果OD值<CUT OFF，样品为人YFV-IgM阴性。
4.阳性结果：如果OD值≥CUTOFF，样品为人类YFV-IgM阳性。

D.注意事项
1.在实验之前，离心每个试剂盒组分数分钟，将所有试剂倒入试管底部。
2.在混合或重新组装部件时避免起泡或气泡。
3.洗涤缓冲液可结晶并分离。如果发生这种情况，请加热管以溶解。
4.建议每个对照和样品一式两份或重复测量三次。
5.不要让板在任何时候*干燥！这可以使板上的生物材料失活。
6.不要重复使用移液器吸头和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中过期的组件或组件。
8.将TMB底物B储存在黑暗中，并且为了避免板温育对于温度差的边缘效应，建议在使用前在室温下使TMB底物平衡30分钟。用灭菌的吸头抽吸所需的剂量，不要将残留溶液倒回到小瓶中。

美国NovaBios 黄热病毒抗体ELISA检测试剂盒

成人60岁的年龄或老年人
年龄≥60岁是黄热病疫苗接种的预防措施，特别是如果这是*给予黄热病疫苗。从不良事件被动报告给疫苗不良事件报告系统（VAERS），60岁以上人群严重不良事件的发生率为每10万剂次分配7.7次，而所有疫苗接种者为10/10万人。 YEL-AND和YEL-AVD的风险在该年龄组中也分别增加，每100,000剂量分别为2.2和1.2，而对于所有疫苗接种者，YEL-AND和YEL-AVD的风险分别为0.8和0.3 / 100,000。鉴于YEL-AVD已被专门报道，YEL-AND几乎*在初级疫苗接种者中，应该与可能*接受黄热病疫苗的老年旅行者进行警惕。如果旅行是不可避免的，对年龄≥60岁的旅客的接种决定需要根据目的地特定的接触YFV的风险来衡量疫苗接种的风险和收益。
艾滋病毒感染
对于年龄<6岁的儿童，CD4 T淋巴细胞值为200-499 / mm3或15％-24％的无症状HIV感染是黄热病疫苗接种的预防措施（另见上文禁忌症部分中关于HIV感染的讨论）。本组未进行大型前瞻性随机试验，以充分解决黄热病疫苗的安全性和有效性。根据CD4计数，回顾性和前瞻性研究共纳入> 500例艾滋病毒感染者，报告称中度免疫抑制患者无严重不良事件。然而，HIV感染与对许多灭活和减毒疫苗（包括黄热病疫苗）的免疫应答减少有关。艾滋病毒感染者免疫反应减弱的机制是不确定的，但似乎与HIV RNA水平和CD4 T细胞计数相关。
如果无症状的艾滋病毒感染者具有中度免疫抑制（CD4 T淋巴细胞值为200-499 / mm3，年龄<6岁儿童总淋巴细胞的15％-24％）正在出现黄热病流行地区，接种可能是考虑。疫苗接种后应密切监测接种人群;如果发生不良事件，应通知*门或CDC，并向VAERS报告。但是，如果旅行要求 - 不是黄热病风险 - 是接种艾滋病毒感染者的*原因，则应免除接种免疫，并颁发医疗豁免以符合卫生规定。
如果无症状的艾滋病毒感染者没有基于CD4计数（CD4 T淋巴细胞值≥500/ mm3或≥6岁儿童的总淋巴细胞的≥25％）的免疫抑制证据，如果推荐，可以施用黄热病疫苗。
因为接种无症状的艾滋病毒感染者可能比未感染艾滋病毒的疫苗接种效果较差，因此在旅行前应考虑测量其抗中性抗体对疫苗接种的反应。*门或疾控中心疾病预防控制中心，讨论血清学检测。

美国NovaBios 黄热病毒抗体ELISA检测试剂盒

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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e aware of peak mosquito hours. The peak biting times for many mosquito species is dusk to dawn. However, Aedes aegypti, one of the mosquitoes that transmits yellow fever virus, feeds during the daytime. Take extra care to use repellent and protective clothing during daytime as well as during the evening and early morning. Staying in accommodations with screened or air-conditioned rooms, particularly during peak biting times, will also reduce risk of mosquito bites.
What should I do if I think a family member might have yellow fever?
If you or anyone in your household has symptoms that are causing you concern, consult a healthcare provider promptly for proper diagnosis.
Frequently Asked Questions About Yellow Fever Vaccine
I just received the yellow fever vaccine. Do I need to avoid contact with my immunocompromised family member?
No. There is no evidence that people who receive yellow fever vaccine shed the vaccine virus. Therefore, there is no need to avoid people including those whose immune systems do not work well.
Who should get yellow fever vaccine?
Yellow fever vaccine is recommended for people age 9 months or older who are traveling to or living in areas at risk for yellow fever virus transmission in South America and Africa. Proof of yellow fever vaccine may be required for entry into certain countries. Country-specific yellow fever risk information, along with vaccine recommendations, can be found in the Yellow Fever Vaccine Requirements and Recommendations table. For some countries, there are only certain areas where there is a risk for yellow fever; for those countries, more specific information is given in the chart to guide the recommendation for vaccination.