48T/96T-IL-27人白介素27ELISA试剂盒说明书

IL-27人白介素27ELISA试剂盒HLAMP-2人溶酶体相关膜蛋白2酶联免疫  HSP-70大鼠热休克蛋白70酶联免疫
HC gp-39人软骨糖蛋白39酶联免疫  Hsp-60小鼠热休克蛋白60酶联免疫
OPAs人不透光相关蛋白酶联免疫  Hsp-60人热休克蛋白60酶联免疫
flagellin人鞭毛蛋白酶联免疫 Hsp-60鸡热休克蛋白60酶联免疫

IL-27人白介素27ELISA试剂盒用 途：
用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中IL-27人白介素27ELISA试剂盒   的含量。

Access RT-PCR Introductory System
Access RT-PCR System
pGEM®-T Vector Systems II
pGEM®-T Vector Systems I
pTARGETTM Mammalian Expression Vector System
pGEM®-T Easy Vector Systems II
pGEM®-T Easy Vector Systems I

反应元件结合蛋白酶联免疫 HSP-20兔热休克蛋白20酶联免疫
Agrin人聚集蛋白酶联免疫 HSP-20人热休克蛋白20酶联免疫
AGRP人Agouti相关蛋白酶联免疫 HSP-20鸡热休克蛋白20酶联免疫
MCP/CD46人膜辅蛋白酶联免疫  HSP-20大鼠热休克蛋白20酶联免疫
EloA人延伸蛋白A酶联免疫 HSP gp9大鼠热休克蛋白糖蛋白96酶联免疫
ASP人酰化刺激蛋白酶联免疫  HSP gp96小鼠热休克蛋白糖蛋白96酶联免疫
BPI人杀菌性/通透性增加蛋白酶联免疫  HSP gp96人热休克蛋白糖蛋白96酶联免疫
MEPE人细胞外基质磷酸糖蛋白酶联免疫  HSL人激素敏感性脂肪酶酶联免疫
RPA-70人复制蛋白A酶联免疫  HSF1小鼠热休克因子1酶联免疫
COMP人软骨寡聚基质蛋白酶联免疫  hs-CRP鱼类超敏C反应蛋白酶联免疫
TAP人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白酶联免疫 hs-CRP小鼠超敏C反应蛋白酶联免疫

步骤方法一

双抗体夹心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。