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Cpn-Ab人肺炎衣原体抗体ELISA试剂盒
PM-Scl/PM-1人抗多发性肌炎硬皮病抗体酶联免疫 TG小鼠甲状腺球蛋白酶联免疫
PL7人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶酶联免疫 TG人甲状腺球蛋白酶联免疫
PL12/AlaRS人PL12抗体/抗氨酰tRNA合成酶酶联免疫 TG大鼠甲状腺球蛋白酶联免疫
anti-Mi2-Ab人抗Mi2抗体酶联免疫 TG大鼠甘油三酯酶联免疫
Cpn-Ab人肺炎衣原体抗体ELISA试剂盒 途:
用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中Cpn-Ab人肺炎衣原体抗体ELISA试剂盒的含量。
anti-Ku-Ab人抗Ku抗体酶联免疫 Tgtp人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶酶联免疫
anti-IgA-Ab人抗IgA抗体酶联免疫 TGSF小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子酶联免疫
ANNA-1/Hu人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体酶联免疫 TGSF人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子酶联免疫
anti-DNase B人抗DNA酶B抗体酶联免疫 TGSF大鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子酶联免疫
BP180-Ab人抗BP180抗体酶联免疫 TGM2人转谷氨酰胺酶2C多肽酶联免疫
BB-Ab人抗BB抗体酶联免疫 TGF-β2猪转化生长因子β2酶联免疫
ASMA人抗平滑肌抗体酶联免疫 TGFβ2小鼠转化生长因子β2酶联免疫
LMA人抗肝细胞膜抗体酶联免疫 TGFβ2兔转化生长因子β2酶联免疫
LSP人抗肝特异性脂蛋白抗体酶联免疫 TGFβ2人转化生长因子β2酶联免疫
步骤一
双抗体夹心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。