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乳腺腺癌
在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。
初学者易犯错误:
1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。
2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。
3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。
4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。
细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。
细胞的相关产品如下:
MCF-7 乳腺腺癌
SMMC-7721 肝癌
Acc-2 涎腺腺样囊性癌
786-O 肾透明细胞腺癌
Acc-3 涎腺腺样囊性癌
PC-3 前列腺癌
KB 口腔表皮样癌
T-24 膀胱变移细胞癌
HEp-2 喉表皮样癌
SCaBER 膀胱鳞癌
CNE 鼻咽癌
细胞计数:
1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。
2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸 5滴细胞悬液到一离心管中,加入 5滴台盼蓝染
液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。
3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
4.统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有 16 个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。
5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:(细胞悬液的细胞数)/ml= ( 四个大格子细胞数/4) ×2×104
说明:公式中除以4 因为计数了4 个大格的细胞数。公式中乘以2因为细胞悬液于染液是 1:1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
公司其他生物培养基产品有:
硝酸盐还原试剂盒 用于硝酸盐还原试验配套试剂
改良马丁液体培养基 Martin Broth ,Modified 用于菌苗及生物制品霉菌无菌检验
改良马丁琼脂培养基 Martin Agar Medium ,Modified 用于生物制品霉菌无菌检验
霉菌培养基 Mould Medium 用于药品,生物制品霉菌无菌试验(GB标准)
BPLS琼脂 BPLS Agar 用于药品等多种标本中沙门氏菌检验选择性分离培养(美国药品和欧洲药品检测推荐方法)
营养琼脂(NA) Nutrient Agar 细菌总数测定,细菌传代培养
四号琼脂基础 No.4 Agar Base 用于霍乱弧菌的选择性分离,后加亚碲酸钾
SS 琼脂 Salmonella-Shigella Agar 选择性培养基,用于沙门氏菌,志贺氏菌的选择性分离
伊红美蓝琼脂(EMB) Eosin-Methylene Blue Agar 弱选择性培养基,用于肠道菌的选择性分离
三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar 用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(葡萄糖,乳糖,蔗糖)
MCF-7 乳腺腺癌
RAW264.7 单核细胞-巨噬细胞
F9 胚胎瘤
NG108-15 小鼠神经细胞瘤×大鼠神经胶质细胞杂交细胞
C6 胶质瘤
RH-35 肝癌
SHZ-88 乳腺癌
PC-12 肾上腺嗜铬细胞瘤
A431 表皮癌
A673 横纹肌癌
Tca-8113 舌鳞癌