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XB1776-人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)

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"人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)

7WCY1.0


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相关知识>>>>

原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
  原代细胞(primary cell) 动物组织经胰蛋白酶等消化,分散,获得单个细胞,再生长于培养皿中。大多数组织可以制备原代细胞,但生长的快慢及难易程度不一。肾和睾丸zui常用,甲状腺细胞生长较慢,只用于某些特定的病毒如猪传染性肠胃炎病毒的培养。
细胞膜(Cell Membrane):
  细胞壁的内侧紧贴着一层极薄的膜,叫做细胞膜。这层由蛋白质分子和磷脂双层分子组成的薄膜,水和氧气等小分子物质能够自由通过,而某些离子和大分子物质则不能自由通过,因此,它除了起着保护细胞内部的作用以外,还具有控制物质进出细胞的作用:既不让有用物质任意地渗出细胞,也不让有害物质轻易地进入细胞。
  实验步骤
  1.人无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手。
  2.倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。
  3.超净台台面应整洁,用0.1%新洁尔灭溶液擦净。
  4.打开超净台的紫外灯照射台面20min左右,关闭超净台的紫外灯,打开抽风机清洁空气,除去臭氧。
  5.点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。
  6.将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。
  7.倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2—3mLHanks液洗去残留的旧培养基,或用少量胰酶涮洗一下。
  8.每个大培养瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察,当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中。
  9.加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7~10mL/大瓶,3~5mL/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖上瓶盖,适度拧紧后再稍回转,以利于CO2气体的进入,将培养瓶放回CO2培养箱。
  10.对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。可将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
按照常规的组织学分类方法,脊椎动物和人体细胞类型约有200余种。
  这些细胞在人体中呈现有序的空间分布。
  细胞是人体的结构和功能单位。共约有40万--60万亿个,细胞的平均直径在10--20微米之间。
  除成熟的红血球外,所有细胞都有一个细胞核,是调节细胞作用的中心。
  zui大的是成熟的卵细胞,直径在0.1毫米以上;zui小的是血小板,直径只有约2微米。
  而175000个精子细胞才抵得上一个卵细胞的重量。
  肠粘膜细胞的寿命为3天,肝细胞寿命为500天,而脑与骨髓里的神经细胞的寿命有几十年,  同人体寿命几乎相等。血液中的白细胞有的只能活几小时。  在整个人体中,每分钟有1亿个细胞死亡。
  zui为神奇的是大脑的神经细胞的神经冲动传递速度超过400公里/小时,相当于777飞机速度的一半。
  每个细胞中含有的分子数相当于银河系中星星数量的一万倍那么多!
传代培养中的细胞传代培养(subculture),当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养。这个过程就称为传代(passage)或者再培养(subculture)。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段.
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