一抗·SCN1A抗体,电压阀门钠通道蛋白a1/癫痫相关蛋白抗体

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抗体名称：

Anti-SCN1A抗体,电压阀门钠通道蛋白a1/癫痫相关蛋白抗体  报价
产品规格: 0.1ml/0.2ml
产品价格：询价（电询或客服）
抗体来源：Rabbit OR Mouse
产品用途：科研实验。
性 状： Lyophilized or Liquid
浓 度： 1mg/1ml
亚 型： IgG
贮 存： 贮存于-20℃.
相关标记: HRP Biotin Gold RBITC AP FITC Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 APC Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647
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Anti-SCN1A抗体,电压阀门钠通道蛋白a1/癫痫相关蛋白抗体  说明书，提供技术：   
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RS2818 C6细胞， 大鼠胶质瘤细胞系
RS2819 Calu-6细胞， 人肺癌细胞系（未分化癌）           

免疫组化实验备注：抗体本身不可能限定一定要用冰冻切片或者一定要用石蜡切片，但抗体对2种切片都能做。这个要根据老师的目的来选择。
     抗原修复我核对过技术参数，一下附录的4种都可以应用，zui常见选择方法2，但不管哪种，达到的目的一样。不存在哪种好哪种差的疑问！
石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr；
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2 min；75%乙醇2min，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min；
4.抗原修复： 根据抗体说明书*方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗涤（2×2min）（具体修复方法见附1）* 注：有些抗原勿需修复，直接进入第5步封闭。
5.封闭： 滴加试剂B，37℃湿盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用试剂C（选择合理的工作比例），37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜；
7.洗涤： TBS-T洗涤（3×5 min）；
8.封闭： 滴加试剂B，37℃湿盒孵育10 min；
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的*化二抗（试剂D），37℃湿盒中孵育30 min；
10.洗涤： TBS-T洗涤（3×5 min）；
11.封闭： 滴加试剂Tween 20，37℃湿盒孵育封闭20 min；
12.加HRP-SA： 滴加用试剂C稀释的试剂E（1：50~200，终浓度5~20 nM），37℃湿盒中孵育30 min；
13.洗涤： TBS-T洗涤（3×5 min），TBS洗涤（2×5 min）；
14.显色：应用DAB溶液（试剂F）显色；
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
17.观察成像： 显微镜下观察成像。
注意事项：
1. 修复后缓冲液须自然冷却，自来水冲洗后方能把切片取出，骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到，用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。
3. 若试剂为微量浓缩液，用前应低速离心，将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS充分洗涤，以便洗去组织上残留的Tween 20，否则会影响结果观察。
5. 如须复染细胞核，则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。
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