弗氏柠檬酸杆菌

产品简介：弗氏柠檬酸杆菌是成体干细胞的一种，具有*的自我更新能力，在体外可诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、心肌细胞以及神经元细胞等多种细胞，是组织工程和再生治疗的一种重要细胞。近20年来，骨髓间充质干细胞是成体干细胞研究领域的重点，它的一些生物学特性在许多疾病治疗中显示出巨大的潜力。MSCs在骨髓中含量极低，使用前需要进行体外培养、扩增和纯化。利用稳定的MSCs细胞株，可以为关于MSCs的深入研究提供可靠的细胞资源，同时为研究工作节约宝贵时间和培养费用。

弗氏柠檬酸杆菌传代方法：

 收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml*培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次。　

制备:

1. 分离和培养宿主细胞；

2. 通过病毒介导或者其它的方式将多能性相关的基因导入宿主细胞；

3. 将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并在ES细胞培养体系中培养，同时在培养期间根据需要加入相应的小分子物质以促其重编程；

4. 出现ES样克隆后进行IPS细胞的鉴定（细胞形态、特定基因的表达、表观遗传修饰、体外分化潜能等方面）。

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