人血管内皮细胞粘附分子1（VCAM-1）elisa检测试剂盒*

人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)elisa检测试剂盒 ，英文名：Human VCAM-1 ELISA Kit
产品简单说明：VCAM-1，又名CD106,血管内皮细胞粘附分子-1。VCAM-1是一种膜相关蛋白，分布于血管内皮及其周围的淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。其基因编码产物相对分子质量为110×103，分子的细胞外部分由6个Ig样结构域组成。VCAM-1的受体是极迟抗原-4(VLA-4)和整合素a4 B7，均属于整合素家族。VCAM-1表达在大多数单个核细胞上，包括嗜酸细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜碱细胞上，但不表达于中性粒细胞上，因此，VCAM-1可选择性促进单个核细胞的黏附。VCAM-1的这一特性可能在恶性血液病骨髓浸润、髓外转移中起重要作用。提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

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ELISA的比色测定由酶标仪进行。有的同行可能会认为，既然由酶标仪进行，那么此时便可以万事大吉了，其实不然，因为当代较为先进的酶标仪，均有较多的功能，使用不当，会得到令人难以理解的人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)elisa检测试剂盒实验结果。如使用酶标仪比色测定后，有许多的阴性测定孑L的吸光度值为负数；或测定假阳性率大大增加等等。这主要是没有正确地理解和使用酶标仪所致。
此外，在加入底物开始显色反应前，是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加1滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。以OPD为底物，配好后应为五色，否则就不能使用。以TMB为底物，整个显色反应过程无需避光，而以OPD为底物，则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后，加入酸终止反应，振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。

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在目前的以HRP作为标记酶的商品市场ELISA试剂盒中，如以TMB为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以OPD为底物，则试剂盒提供OPD片剂或粉剂，临用前配制。一般商品人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)elisa检测试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15～30min。从理论上说，37℃30min才可以使HRP的底物催化反应*，尽管在zui初的10min内，绝大部分催化反应即可完成。因此，为使弱阳性样本孔能有充分的显色，建议在37℃下反应25～30min后，终止反应比色测定。