HUVECS 人脐静脉内皮细胞|细胞株说明书

HUVECS 人脐静脉内皮细胞|细胞株
    说明
    1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。
    （注：4℃下zui多贮存24小时，室温下不超过6小时，否则废弃）
    2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。
    3 ).HUVECS 人脐静脉内皮细胞|细胞株用*夹紧脐带下端，加入15ml 的胶原酶（1mg/ml）室温下消化15-20分钟，并不时上下摇动脐带。
    4 ). 消化完后，将下端*松开，消化液流入一个50 ml无菌离心管中，用无菌的PBS溶液冲洗脐带2-3次。
    5 ). 将收集液离心（2000转/分）3分钟。
    6 ). 倒去上清，加入10ml M199培养基（加入10U/ml的bFGF），用弯管吹散细胞，将所有液体转入一个用明胶包被好的培养瓶中，37℃培养。
        （注：每个培养瓶中加入3-4ml无菌的1%的明胶溶液，摇匀使得明胶溶液*铺满瓶底，放入37℃孵育，zui少2小时，用前将明胶溶液倒了即可，明胶包被有利于细胞贴壁。）
    7 ). 培养24小时后，倒掉培养基，并用无菌的PBS溶液清洗2-3次，洗掉红细胞和死细胞，加入10 ml新鲜的 M199培养基。
    8 ). 以后每2天换一次培养基（每次换掉2/3的培养基）。
    9 ).一般培养5-7天，细胞可长满至80-90%单层，这时可以传代。
    10 ).HUVECS 人脐静脉内皮细胞|细胞株倒掉培养基，用无菌的PBS溶液清洗2-3次，加入2-3ml消化液（0.25%*+0.1%EDTA）消化细胞，在显微镜下观察，一旦细胞变圆，即加入2-3倍的有血清的DMEM培养基终止反应。
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细胞分离、培养、鉴定：
（1）从中国正常人、中国病人、小鼠、大鼠、兔、猪、牛等等组织中对原代细胞进行分离、培养、鉴定：我们将以客户要求为标准，提供多种属如中国正常人、中国病人、小鼠、大鼠、兔、猪、牛、其它动物原代细胞的分离、培养、鉴定，并提供相应的文件、资料、数据和检测证书。对于人源性细胞，必要时，在许可的条件下，我们尽可能的满足客户所提供的要求。
（2）从建立实验性疾病动物（小鼠、大鼠、兔）模型体内组织中对HUVECS 人脐静脉内皮细胞|细胞株行分离、培养、鉴定： 我们将以客户要求，建立标准实验性疾病动物模型，或客户提供实验性疾病动物模型，对原代细胞进行分离、培养、鉴定，并提供相应的文件、资料、数据和检测证书。
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