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三磷酸腺苷结合盒G1抗体动物体内单抗的方法迄今为止,通常情况下均采用动物体内单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然*BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而用SPF级小鼠。三磷酸腺苷结合盒G1抗体A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液体石蜡。c. 处于对数生*的杂交瘤细胞。
B、方法:a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后,每天观察小鼠腹水产生情况,如腹部明显膨大,以手触摸时,皮肤有紧张感,即可用16号针头采集腹水,一般可连续采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 将腹水离心(2000r/min 5分钟),除去细胞成分和其他的沉淀物,收集上清,测定抗体效价,分装,-70℃冻存备用,或冻干保存。三磷酸腺苷结合盒G1抗体
(2) 体外培养单抗的方法总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。
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大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA
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大鼠白介素11(IL-11)ELISA
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA
大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA
大鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA
大鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA
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大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA
大鼠生长激素(GH)ELISA
大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA
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大鼠FMS样*激酶3(Flt3)ELISA
大鼠FMS样*激酶3配体(Flt3L)ELISA
大鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA
大鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA
大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA
大鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA
大鼠凋亡相关因子配体(FASL) ELISA
大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA
大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA
大鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA
大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA
大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA
大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA
大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫分析大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫分析体(sEPCR)ELISA
杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室zui常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。三磷酸腺苷结合盒G1抗体