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抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗体1000

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更新时间:2019-11-08

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抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗体动物体内生产单抗的方法迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然*BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而用SPF级小鼠。抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗体A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液体石蜡。c. 处于对数生长期的杂交瘤细胞。
B、方法:a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后,每天观察小鼠腹水产生情况,如腹部明显膨大,以手触摸时,皮肤有紧张感,即可用16号针头采集腹水,一般可连续采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 将腹水离心(2000r/min 5分钟),除去细胞成分和其他的沉淀物,收集上清,测定抗体效价,分装,-70℃冻存备用,或冻干保存。抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗体(2) 体外培养生产单抗的方法总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。
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小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)
小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)
小鼠组胺(HIS)
小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)
小鼠热休克蛋白90(HSP-90)
小鼠热休克蛋白70(HSP-70)
小鼠脂联素(ADP)
小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)
小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)
小鼠周期素D3(Cyclin-D3)
小鼠周期素D2(Cyclin-D2)
小鼠雌激素(E)
小鼠周期素D1(Cyclin-D1)
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)
小鼠转化生长因子α(TGF-α)
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)
小鼠前列腺特异性抗原(PSA)
小鼠卵巢癌标志物CA125
小鼠乳腺癌标志物-CA153
小鼠胃肠癌标志物CA199
小鼠血红素氧合酶1(HO-1)
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)
小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)
小鼠甲状腺球蛋白(TG)
小鼠抑制素A(INH-A)
小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)
小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)
小鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7) 
 杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室zui常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模生产。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗体


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